同等學力西醫綜合分子生物學考點

1.蛋白質磷酸化及去磷酸化

蛋白質的磷酸化是指由蛋白質激酶催化的把ATP或GTP上γ位的磷酸基轉移到底物蛋白質氨基酸殘基上的過程，其逆轉過程是由蛋白質磷酸酶催化的，稱為蛋白質脫磷酸化。

蛋白質磷酸化通常發生在含羥基的氨基酸殘基，主要是絲氨酸，蘇氨酸，酪氨酸。

2.蛋白質的分子結構及生物活性

一級結構 二級結構 三級結構 四級結構

定義 蛋白質分子中從N-C端的氨基酸序列 某一段肽鏈的局部主鏈空間結構 在二級結構基礎上單個多肽鏈進一步折疊 兩個以上的亞基之間的空間排布和相互作用。

表現形式 肽鏈 a-螺旋、β-折疊、β-轉角、無規卷曲 結構域、分子伴侶 亞基

維系鍵 肽鍵、二硫鍵 氫鍵 疏水鍵、鹽鍵、氫鍵、Van der Waals力 氫鍵、離子鍵

蛋白質變性：是蛋白質在受到光照、熱、有機溶劑以及一些變性劑的作用時，次級鍵遭到破壞導致天然構象的破壞，其特定的空間構象被改變，但其一級結構不發生改變。

蛋白質復性：如果變性條件劇烈持久，蛋白質的變性是不可逆的。如果變性條件不劇烈，這種變性作用是可逆的，說明蛋白質分子內部結構的變化不大。這時，如果除去變性因素，在適當條件下變性蛋白質可恢復其天然構象和生物活性，這種現象稱為蛋白質復性。例如胃蛋白酶加熱至80～90℃時，失去溶解性，也無消化蛋白質的能力，如將溫度再降低到37℃，則又可恢復溶解性和消化蛋白質的能力。

3.真核RNA聚合酶、原核RNA聚合酶、啟動子、增強子等的作用。

均是參與轉錄活動，非復制。

1)增強子是增強基因啟動子工作效率的順式作用序列，基因的轉錄作用將會加強。

2)啟動子是RNA聚合酶特異性識別和結合的DNA序列，是控制轉錄的起始時間和表達的程度。啟動子就像“開關”，決定基因的活動。

#原核生物的RNA聚合酶：

亞基功能

決定哪些基因被轉錄

與轉錄全過程有關

結合DNA模板

辨認起始點

真核生物的RNA聚合酶:

種類 Ⅰ Ⅱ Ⅲ

轉錄產物 45S-rRNA hnRNA 5S-rRNA、tRNA、snRNA

對鵝膏覃堿的反應 耐受 極敏感 中度敏感

細胞內定位 核仁 核質 核質

真核生物RNA聚合酶Ⅱ最大亞基的羧基末端有一段共有序列是Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser的重復序列片段，稱為羧基末端結構域。所有的真核生物RNA聚合酶Ⅱ都有CTD，只是7個氨基酸共有序列的重復程度不同。CTD對維持細胞的活性是必需的。

4.遺傳物質的堿基組成、DNA的組成

堿基共有5種：胞嘧啶(縮寫作C)、鳥嘌呤(G)、腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T，DNA專有)和尿嘧啶(U，RNA專有)。

核酸有核糖核酸(RNA)和脫氧核糖核酸(DNA)兩種。

組成DNA(脫氧核糖核酸)的基本單位——脫氧核苷酸

組成RNA(核糖核酸)的基本單位——核苷酸

組成多糖的基本單位——單糖

組成蛋白質的基本單位——氨基酸

脂肪是甘油和三分子脂肪酸合成的甘油三酯。

5.酶活性調節的三種方式：

1)酶原激活：酶原向酶轉化的過程，一定條件下酶前體水解開特定的肽鍵致使構象改變而表現出酶的活性的過程，實際上是酶活性中心形成或暴露的過程。采用蛋白酶解方式激活的是胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧基肽酶、彈性蛋白酶等。

2)變構調節：體內一些代謝產物可與某些酶分子活性中心以外部位可逆結合，使酶發生變構并改變其催化活性，這種調節方式為變構調節。采用別構調節方式激活的是天冬氨酸轉氨甲酰酶(ATCase)。

3)共價修飾：酶蛋白肽鏈上一些基團可與某種化學集團發生可逆的共價結合從而改變酶活性的過程。

6.真核生物轉錄過程中的剪接及GU-AG規則(2011年、2012年各考了一道題)

剪接的過程就是真核生物基因轉錄過程中對mRNA前體進行的加工方式，是按照GU-AG規則進行的。GU-AG規則是指真核生物轉錄生成初級RNA轉錄物，RNA 內含子序列5’端的起始兩個核苷酸總是5’-GU-3’，并且其3’端的最后兩個核苷酸總是5’-AG-3’，5’-GU-3’和5’-AG-3’稱為剪接接口，剪接后，能除去初級mRNA上的內含子，把外顯子連接為成熟的mRNA。

7.真核生物DNA聚合酶、原核生物DNA聚合酶的作用(2011年考2道題、2012年考1題)

原核細胞有3種DNA聚合酶，分別是DNA聚合酶I、 DNA聚合酶II、 DNA聚合酶III。

DNA聚合酶I：切除引物，對復制中的錯誤進行較讀，對復制和修復中出現的空隙進行填補。

DNA聚合酶II：參與DNA損傷的應急狀態修復(SOS修復)。

DNA聚合酶III：催化原核生物的復制延長。

5’-3’核酸外切酶活性 + — —

3’-5’核酸外切酶活性 + + +

5’-3’核酸聚合酶活性 + + +

(3’-5’核酸外切酶活性：能辨認錯配的堿基對，并切除，具有校正功能。5’-3’核酸外切酶活性：能切除突變的DNA片段。)

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