臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試微生物學知識點精講

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第八節(jié) 細菌感染的檢查方法與防治原則

大綱要求：

1. 細菌學診斷：(1)標本的采集原則;(2)檢驗程序

2. 血清學診斷： 常用的血清學診斷方法。

3. 人工主動免疫與被動免疫：(1)特異性免疫的獲得方式 (2)人工免疫的概念和常用的免疫制劑。

一 細菌學診斷

1. 標本的采集原則：重點

(1) 早期采集細菌標本，未應用抗生素前進行。

(2) 嚴格無菌操作，防止被其他微生物污染。

(3) 根據(jù)病種確定標本類型和采集部位。

(4) 做好標記，盡快送檢。一般情況下冷藏送檢，但奈瑟氏菌需室溫送檢

2. 檢驗程序，常用的五類病原學診斷方法

(1) 鏡下檢查：初步涂片染色，觀察細菌結(jié)構(gòu)

(2) 分離、培養(yǎng)、鑒定：進行生化反應鑒定

(3) 抗原檢測：紅細胞凝集、放免(ria)、酶免疫(eia)和免疫熒光

(4) 分子生物學：核酸雜交、pcr及基因芯片檢測核酸

(5) 免疫學試驗：檢測宿主的抗體和細胞免疫指征

上述方法需要結(jié)合流行病學和臨床體格檢查綜合作出判斷

在適當?shù)那闆r下，根據(jù)標本類型作出合理判斷，選擇性應用上述方法進行檢查，提高檢出率。

例題：標本采集原則不包括

a.未應用抗生素前進行b.嚴格無菌操作c.均需要低溫送檢d.根據(jù)病種確定標本類型和采集部位e.盡快送檢

答案 c 解析 奈瑟氏菌需要常溫下送檢。

二 血清學診斷：用已知細菌或細菌抗原檢測體液中有無相應抗體及抗體效價。

1. 酶聯(lián)免疫吸附試驗(elisa)、放射免疫試驗(ria)及免疫熒光試驗：運用不同標記檢測血清中的特異性抗體或特異性抗原。

2. 蛋白印記實驗 (western blot)：sds-page電泳分離混合蛋白條帶，而后用特異抗體與之雜交，再加入酶或同位素標記的二抗，然后曝光顯示蛋白條帶，可用于驗證elisa的正確與否，在aids中檢測最常用。

3. 中和試驗(nt)：先在血清中加入特異抗原或抗體發(fā)生中和，再檢測血清中的目的抗體或抗原，如果是陰性，則中和試驗陽性。如抗鏈o試驗，用于風濕熱

4. 試管凝集試驗：抗體效價的檢測。抗體效價高或恢復期血清抗體大于等于急性期的4倍，支持該病原體感染，如肥達氏反應用于傷寒副傷寒感染檢測。

三 人工主動免疫與人工被動免疫

1. 對某種感染性疾病的特異性免疫可有病后天然免疫和人工免疫獲得。

2. 人工主動免疫：用人工接種的方法給機體注射抗原性物質(zhì)，使機體免疫系統(tǒng)因受抗原刺激而產(chǎn)生體液和細胞免疫應答的過程。接種后1-4周產(chǎn)生免疫應答，用于疾病預防。免疫制劑包括：減毒活疫苗、滅活疫苗、類毒素、亞單位疫苗和基因工程、dna疫苗。

3. 人工被動免疫：將含有特異性抗體的免疫血清或免疫細胞因子等制劑，直接注入機體，使之立即獲得免疫力的過程。免疫制劑包括：抗毒素、丙種球蛋白、細胞免疫制劑等。

4. 常見免疫制劑

(1) 減毒活菌(疫)苗：如卡介苗、鼠疫減毒活疫苗、布魯氏菌活疫苗、炭疽活菌。

(2) 滅活菌(疫)苗：百日咳滅活菌苗、傷寒滅活疫苗、霍亂滅活疫苗

(3) 類毒素：外毒素經(jīng)0.3-0.4%甲醛處理，毒性消失，但抗原性保留，如白喉類毒素、破傷風類毒素，與滅活菌苗混合接種，有免疫佐劑效果

(4) 亞單位疫苗：用化學法提取病原菌中有效的免疫原成分支持，如腦膜炎球菌多糖疫苗和肺炎鏈球菌莢膜多糖疫苗

(5) 基因重組疫苗或基因工程疫苗：用工程菌表達微生物特異抗原成分，純化制成疫苗，如乙肝重組疫苗

(6) dna疫苗，研究階段

(7) 抗毒素：破傷風、白喉、肉毒抗毒素等

(8) 丙種球蛋白：人血丙種球蛋白，無特異性;特異性丙種球蛋白，人經(jīng)某種疫苗免疫后取其特異丙種球蛋白，用于預防和治療。

(9) 細胞免疫制劑，如細胞因子。

1-6為人工主動免疫制劑，后3種為被動免疫制劑。

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（責任編輯：中大編輯）

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